犬的人工授 犬的人工授精是指用人工的方法,將公犬的精液採取出來,通過嚴格的科學檢查處理,用新鮮精液或冷凍精液,輸入到母犬的生殖器官內,使精子與卵子結合,達到繁殖優良犬的目的。 一、採精 1 .採精的準備工作 ( 1 )場地的準備 為了保證公犬有一個良好的性慾反射條件,必須選好採精的場地。採精場地應寬敞、安靜、清潔,並要徹底消毒。 ( 2 )台犬的準備 目前多採用發情的母犬作為台犬。採精前台犬的後軀、尾根部、外陰部、肛門部位,都應徹底洗滌清潔,再用消毒過的乾抹布擦乾(台犬亦可改用沾染發情母犬之分泌物給予公犬嗅聞)。 2 .采精技術 ( 1 )手握法 當公犬爬跨,陰莖勃起時,採精人員一隻手抓住陰莖的球狀部位之後,另一隻手拿著容器收集精液。在收集精液時,要特別注意器具不能觸及陰莖,否則會造成射精停止。另外,采精手應在陰莖的背部必須保持一定的壓力。用這種方法采到精液,可直接給發情的母犬輸精,不宜保存。 ( 2 )假陰道采精法 首先應根據公犬的陰莖大小製作陰道,其結構主要由外殼、內胎、採精杯及附件組成。在應用時先在假陰道內胎中裝上熱水,其溫度應保持 40℃ 。假陰道內表面不必潤滑劑,因為發情母犬陰道略顯乾燥。當公犬爬跨母犬時,將陰莖導入假陰道內、也可以用手淫的方法,待陰莖勃起時,推進陰道,刺激公犬射精。 二、精液品質檢查 1 .精液量 藏獒的射精量,因其個體、年齡、採精方法、採精頻率和營養狀況等多種因素影響。射精量太多,可能是由於過多的副性腺泌物或其他異物混入,若過少可能是由於採精方法不當或生殖官功能衰退所致。發現這種情況就應該改進采精技術和方法,改進公大飼養管理或調整採精頻率。 2 .精液的顏色,正常的精液為乳白色或灰白色,精子數量越多,乳白色越深。若精液呈淡綠色是混有濃液,呈淡紅色是其中混有血液,呈黃色是混有尿液,凡屬上述顏色的異常精液,應該丟棄或停止采精。 3 .精子活率 是指精液中有改線前進運動的精子百分率,是評定精液品質優劣的重要指標之一,也稱精子活力。檢查方法是在載玻片上放1滴精液,用蓋玻片壓上,製成壓片置於400倍的顯微鏡下觀察。精子活率一般採用10級評分,即按精子直線前進運動的百分比評為10個等級: 100 %前進者為 1 . 0 分,90 %前進的為0.9分,以下類推。 4 .精子密度 是指精液的單位容積(1mL)內所含精子數目,是評定精液品質的一項重要指標,也稱精子濃度。目前測定精子密度的方法主要採用估測法、血細胞計算器計算法。 ( l )估測法 此法通常與檢查精子活率(不做稀釋)同時進行,在顯微鏡下根據精子分佈稠密程度粗略地分為“密”、“中”、“稀” 3 級。 ① 密 整個視野充滿精子,精子之間的空隙小於 l 個精子,看不見精子的活動情況,這種精液每毫升含有精子 10 億以上。 ② 中 精子在視野中比較分散,精子與精子之間的空隙約與精子本身長度相等,可以分清精子活動情況,這種精液每毫升含精子 3~10 億。 ③ 稀 在視野中只能見到少數精子,精子之間的空隙很大,這種精液每毫升含精子在 2 億以下。 ( 2 ) 計算法 用血細胞計算器,在顯微鏡下計數,是比較準確的方法是先用血細胞吸管稀釋精液之後將精液稀釋20 倍時,用血紅細胞吸管稀釋:把精液稀釋成 200 倍時,則用血紅細胞吸管稀釋。稀釋液用 3 %的氯化鈉溶液,以殺死精子便於計算,其計數方法與血細胞計數相同。 5 .精子的畸形率 是指形狀不正常的精子。畸形情子種類很多,如頭部巨大、瘦小、細長、圓形、輪廓不清、皺縮、缺損、雙頭等,頸部膨大、纖細、屈折、雙體等,主段彎曲、屈折、迴旋、短小、長大、缺陷、帶原生質滴、雙尾等,精液中的畸形精子的比率越高,受孕率就越低。一般認為,犬精子畸形率不得超過 20%。 6 .精子的存活時間及存活指數 是指離體精子在一定條件下的壽命,這是判斷精子受精能力的一項指標。將精液采出後,應立即稀釋1: 2 ~3 倍,將稀釋精液置於一定的溫度(0℃~ 37℃ )下,間隔一定時間檢查精子活率,直至無活動精子為止,所需的總小時數為存活時間;兩相鄰2次檢查的平均活率(即 2 次活率相加÷2 )與間隔時間的積相加總和為生存指數。精子的存活時間越長,指數越大,說明精子活力越強,品質也越好,受精率也越高。 7. pH 值的側定 三、精液的稀釋 精液稀釋的目的在於增加精液的容量,擴大配種頭數。稀釋液的成分很多.大致可分為以下 4 類。 1 .稀釋劑 主要用以擴大精液容量,如等滲氯化納溶液、等滲葡萄糖溶液等。 2 .營養劑 主要提供營養,以補充精子所消耗的能量,如葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、鮮奶、乳製品、卵黃等。 3 .保護劑 對精子起保護作用。其中有緩衝物質,如檸檬酸鈉、酒石酸鉀、鈉、磷酸二氫鉀、只羥甲基氨基甲烷、鹼性緩衝液等;非電解物質,如各種糖類、氨基乙酸等;抗菌物質,如青黴素、鏈黴索、卡那黴素、林肯黴素、多黏菌素、氯黴素等;抗凍物質,二甲基亞颯等。 4 .其他添加劑 酶類,如過氧化氫酶β一澱粉酶等;激素類,如縮宮類素,前列腺素 E 型等;維生素類維生素 B1、維生素B2、維生素B12、維生素 C 、維生素 E 等;其他成分,如二氧化碳、乙酸、乙二銨四乙酸、乙烯二醉、亞蹄酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮、ATP 、精氨酸、咖啡因、冬眠靈等。 四、常用稀釋液的配製 1.奶粉稀釋液 奶粉 10~ 12g ,放在三角燒杯內,然後加人燕餾水100mL , 攪拌均勻後過濾,進行蒸煮消毒。 葡萄糖(蔗搪)稀釋液:無水葡萄糧7g ,溶解於100mL 蒸餾水中,過濾,煮沸消毒 。 2 .奶粉、卵黃稀釋液 取奶粉 10g 先用少量水調成糊狀,再加蒸餾水至 100mL用紗布過濾,在水浴中加溫至 95 ℃ ,待冷卻後加入卵巢10mL,青黴素 10 萬ug,鏈黴素 10 萬ug。 稀釋倍數,一般根據原精液的密度來決定,通常犬精液可稀釋 l~3 倍。 五、 精液的保存 精液的保存方法,可分為常溫( 15 ℃ 一 25 ℃ ).低溫( 0 ℃ ~ 5 ℃ )和冷凍?(-79 ℃~-l96% ℃ ) 1. 常溫保存法 主要是利用一定範圍的酸性環境抑制精子的活動,以減少其能全的消耗。常溫有利於微生物的繁殖,故需加入一定的抗生素。此外,加入必要的營養和保護物質,也會有良好的作用。用卵黃、拘櫞酸鈉稀釋犬的第二部分精液,保存 4 天,精子仍其有活力。 2 .低溫保存法 一般用冰箱或冰塊作冷凍源,也可以將貯精瓶浸人井水中。低溫可以抑制精子的活動,降低精子的活動能量消耗,但是冷的刺激又影響精子的生命。所以在稀釋液中必項加入營養物質,如卵黃、奶粉等。犬的第二部分精液用等量的卵黃和 2 . 68 %枸櫞粉酸鈉溶液稀釋,在 4 ℃ 的條件下保存,96小時後還能有 50 %的仔活率;用巴氏滅菌的牛奶做等裏稀釋,在 4 ℃ 條件下能保存120 小時,存活率為 50% ,並能使母犬受孕。 3 .冷凍保存法 利用-196℃ 的液氮、乾冰-79℃ 或其他製冷設備作為冷凍源,將精液經過特殊處理後,保存在超低溫下,以達到長期保存的目的。因分裝形式不同,分為顆粒精液、塑膠細管精液和安瓶冷凍精液。據報導,犬的冷凍精液解凍後活力低,受精率很低,有待於進一步研究,但取鮮精做人工授精,受精率較高,也是提純復壯的好辦法和可行技術。 六、輸精 輸精是指用輸精器把精液愉送到母犬的生殖道內,使母犬達到受精的方法。 1.母犬的準備 將發情母犬保定後,尾巴拉向一邊,將陰門及附近用溫肥皂水擦洗 乾淨,並用消毒液進行消毒,而後再用生理鹽水沖洗,之後擦乾淨。 2 .輸精管的準備 犬的輸精管可用尼龍導管、玻璃細管等,使用前應徹底消和認真的檢查,不能出漏洞。 3. 精液的準備 新採取的精液,經稀釋後應進行品質檢查,然後進行輸精。保存的精液,需要升溫到 35 ℃ 左右,經過鏡檢後合乎標準時,方可用來輸精。 4 .輸精方法 將母犬站立保定,使輸精管沿著背線方向緩慢地旋轉插入陰道7~ 10c m深,於子宮頸口的位置,慢慢注人精液,輸完精後,母犬的後軀抬高片刻,以防止精液流出。
測定的方法是用萬能試紙比色或電動比色來側定,犬的精液ph值平均為 6 . 4 ( 6 . 1~7 . 0 ) , pH 值的高低與副性腺分泌物有關,第一部分精液 pH 值居中、第二部分精液的 pH 值最低;第三部分精液的 pH 值最。pH值偏低的品質較好, pH值偏高的精子活力、受精力都顯著降低。
- Dec 27 Thu 2007 02:13
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